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    人正常組織來源細胞功能檢測方法

    時間:2018-5-16閱讀:180
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    人正常組織來源細胞為了檢測機體的免疫功能,可以通過體外或體內實驗對參與免疫應答的不同細胞進行分離、鑒定及功能測定。用于上述免疫功能檢測的材料Z常用的是外周血,也可以是胸腺、脾、淋巴結及各種組織。
    一、免疫細胞的分離
    體外測定免疫細胞的功能,首先要從不同材料中分離所需細胞。根據細胞的表面標志、理化性質及功能進行設計和選擇不同的分離方法。
    (一)外周血單個核細胞的分離
    外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)包括淋巴細胞和單核細胞。PBMC是免疫學實驗Z常用的細胞,也是進行T、B細胞分離純化過程的*步。常用的分離方法是葡聚糖-泛影葡胺(Ficoll-Urografin)密度梯度離心法。
    (二)淋巴細胞及其亞群的分離
    淋巴細胞及其亞群的分離有多種方法,如玻璃黏附法、尼龍毛分離法、E花環形成分離法等。由于單克隆抗體的應用和免疫學技術的發展,可通過以下方法進行分離。
    1.免疫吸附分離法  將已知抗淋巴細胞表面標志的抗體包被聚苯乙烯培養板,加入淋巴細胞懸液,表達相應細胞表面標志的淋巴細胞被貼附在培養板上,可與細胞懸液中其他細胞分開。
    2.磁珠分離法(immune magnetic bead, IMB)  近年來免疫磁珠法應用較廣泛,是一種特異性分離所需淋巴細胞的方法。
    3.熒光激活人正常組織來源細胞分離儀分離法(fluorescence  activated cell sorting, FACS)  FACS又稱流式細胞術(flow cytometry, FCM),是一種集光學、流體力學、電力學和計算機技術于一體,可對細胞進行多參數定量測定和綜合分析方法。

     核突觸蛋白-γIgG 人真胰島素(TI) 

     核纖層蛋白AIgG 人真核翻譯起始因子3a(eIF3a) 

     核纖層蛋白BIgG 人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28) 

     核纖層蛋白CIgG 人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28) 

     核小體結合蛋白1IgG 人粘蛋白/粘液素7(MUC7)

     核小體組裝蛋白1IgG 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)

     核抑制蛋白磷酸酶1IgG 人粘蛋白/粘液素C(MUCC)
    人正常組織來源細胞

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