人正常組織來源細胞遷移實驗的注意事項

人正常組織來源細胞遷移實驗的注意事項

（1）根據待測細胞體積大小選擇合適孔徑的ThinCert。常用的為8.0-μm孔徑

（如AGS細胞），如果細胞體積較大可以考慮用10-μm孔徑；

（2）根據待測細胞遷移能力強弱調整細胞數和遷移時間。常規24-well 

ThinCert接種細胞數約為2≈5×104/well，遷移時間12≈36小時；

（3）由于Greiner公司的24-Transwell內含24個獨立的ThinCert，為了避免

操作污染，每次實驗可預先另準備一塊24孔普通培養板（Greiner）；

（4）如果細胞遷移能力較弱，下室液體可用3T3細胞無血清培養24小時獲得的

上清加50μg/ml FN（Fibronectin），具體可查閱相關文獻；

（5）細胞懸液加入膜中央，盡量保證液面水平；

（6）固定染色擦洗時動作小心，避免擦去膜底面的細胞。但一定要充分擦凈膜

表面上未遷移的細胞，以免影響讀數。尤其是膜周邊上可用細牙簽或小鑷

子纏上濕棉花擦洗，但要小心避免將膜戳破；

（7）Chamber和膜上都無法標記，操作時應小心避免混淆實驗組和對照組；

（8）充分晾干，避免殘留水分導致鏡下聚焦不一致。

人正常組織來源細胞侵襲實驗（cell invasion assay）

實驗材料

（1）Matrigel (BD 5mg/ml)，-20℃保存

（2）其余材料同遷移實驗

140723－200501 鑒別 20mg γ-氨酪酸

140728-200803 HPLC法含量測定 50mg 胸腺五肽

140729-200501 HPLC法含量測定 25mg 賴脯胰島素

140730-20060 HPLC法含量測定 20mg/4℃ 醋酸奧曲肽

140731-200501 鑒別用 1.6PNA單位/支 尤瑞克林

140732-200501 供門冬酰胺酶鑒別用 5mg 門冬酰胺酶（大腸桿菌）

140733-200501 供門冬酰胺酶鑒別用 5mg 門冬酰胺酶（歐文菌）

140735-200501 檢查 10mg 5'-胞苷酸

140736-200501 鑒別及含量測定 10mg 4'-羥基苯乙酸

140737-200501 HPLC法含量測定 10mg 5'-羥基吲哚乙酸
人正常組織來源細胞