干細胞轉化實驗技術：形態學檢測法

 當機體受到抗原的刺激時，干細胞就可以轉化為淋巴母細胞，進一步轉化為致敏淋巴細胞。這種轉化在一定的程度上代表著機體的細胞免疫功能狀態。這種轉化也可在體外的T細胞的培養過程中加入適當的刺激原而出現，并表現出形態上的變化。目前常采用PHA誘發的淋巴細胞轉化試驗作為檢查機體細胞免疫的功能狀態。具體方法有形態學檢查法。

（一）操作方法 
1． 于培養瓶內加0.2ml馬血，對照組與試驗組各做2瓶，試驗組均加PHA 30?g； 
2．37℃培養72h，每天輕搖1~2次； 
3．取出培養瓶，搖散血，倒入離心管，3 000r/min離心10min，去上清液； 
4．用血球泥制備推片，晾干； 
5．以瑞氏染液染2min~3min，加等量緩沖液，混勻繼續染3min，蒸餾水沖洗后再用姬姆薩染液染2min~3min。加等量緩沖染液感作7min~8min，餾水沖洗，晾干； 
6．鏡檢，觀察，計數。 
（二）注意事項 
1．培養液Z適pH為7.2~7.4，過酸過堿都會影響細胞的生長而降低轉化率。培養液的類型與動物的白細胞有關，如小鼠的淋轉試驗，用RPMI-1640，用199液則不成功。 
2．培養時間 以72h~120h轉化率Z高，超過這個時間，則轉化率反而下降。 
3．吞噬細胞有時在形態上易與“過渡型"混淆。但巨噬細胞有其固有的特點，核占細胞比較小且偏一邊，核染色質濃集，細胞漿呈藍灰色或紅褐色，胞漿內有大小不等的顆粒或吞噬物，且含有大小不等的氣泡。 
4．涂片要少蘸些細胞，推出尾部來，因淋巴細胞較大，易集中在尾部及邊緣。 
5．觀察干細胞轉化，染色不要太濃，以便觀察核仁。 
6．嚴格的無菌操作，是淋巴細胞轉化試驗成功的關鍵。

100316-200402 檢查用 30mg 枸椽酸他莫昔芬E－異構體

100317-200902 HPLC法含量測定 100mg 倍他環糊精

10318－200602 含量測定 100mg 卡托普利

10319－200602 檢查用 50mg 卡托普利二硫化物

100320-200401 含量測定 30mg 卡前列甲酯

100322-200101 含量測定 50mg 卡鉑

100323-200201 檢查用 100mg 氯氮平

100324-200001 含量測定 50mg 林旦

100325-200901 HPLC含量測定 100mg 氯碘羥喹

100326-200201 含量測定 50mg 聯苯芐唑
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