低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞培養(yǎng)方法

低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞培養(yǎng)方法:

收到低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況:

如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:

a,棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。

b,向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋dan酶液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),吸取胰蛋dan酶,加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞。

c,加入等量的的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)

d,傳代比例:1:2-1:3