人正常組織來源細(xì)胞培養(yǎng)問題及解決方案

很多人在人正常組織來源細(xì)胞培養(yǎng)的過程中會遇到各種各樣的小問題，現(xiàn)徠創(chuàng)生物針對細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)常會遇到幾個問題進(jìn)行一下分析：

1、細(xì)胞傳代時間比以前細(xì)胞正常傳代時間長，比如以前傳代需要一天現(xiàn)在傳代需要1.5天或者2天；

2、細(xì)胞在傳代過程中細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)生變化，比如以前細(xì)胞正常形狀是圓形的現(xiàn)在是梭形或者細(xì)胞變瘦；

3、細(xì)胞溶液中有小黑點(diǎn)。

上述原因出現(xiàn)有下面兩組主要原因構(gòu)成：A 支原體污染   B血清營養(yǎng)不夠

A、支原體污染 判斷方案

同一個培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)瓶里面的細(xì)胞  在顯微鏡下逐個觀察如果有80%的細(xì)胞有小黑點(diǎn)可以判斷是支原體污染；

50%一下的細(xì)胞有小黑點(diǎn)， 可以判斷不是支原體污染而是血清營養(yǎng)不夠引起的細(xì)胞有小黑點(diǎn)。

B、血清營養(yǎng)不夠判斷方案

除過上述支原體污染原因外，人正常組織來源細(xì)胞溶液中出現(xiàn)小黑點(diǎn)的主要原因就是培養(yǎng)細(xì)胞的血清營養(yǎng)不夠；

血清營養(yǎng)不夠會引起細(xì)胞過渡性分泌或者細(xì)胞碎片脫落，這些脫落物是形成小黑點(diǎn)的主要原因。

不規(guī)范血（假血清、國內(nèi)灌裝血清）清對下游實(shí)驗(yàn)的影響：

因?yàn)閲鴥?nèi)自然環(huán)境影響（霧霾））加上牛吃的草中有農(nóng)藥殘留，飼料中過度性的促進(jìn)牛生長的添加劑，會引起牛血液中分泌對細(xì)胞生長可能有害的蛋白因子，從而引起科研者研究的目標(biāo)蛋白在細(xì)胞的表達(dá)量或者趨勢不對或者不表達(dá)；這個情況經(jīng)常在WB實(shí)驗(yàn)中發(fā)生（研究的目標(biāo)蛋白趨勢不對或者不表達(dá)）；

綜上所述建議客戶購買有國家資質(zhì)的*血清，比如ZETA LIFE胎牛血清。

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人正常組織來源細(xì)胞