人正常組織來源細胞感染方法

人正常組織來源細胞是我們實驗室*的實驗產品之一，那么細胞感染是什么東西引起？有了細胞感染要注意那么方面？今天就為大家分析細胞感染的方法。

（一）細胞準備
將狀態良好的目的細胞接種到24孔板，使細胞濃度為 1×105/ml 細胞，接種細胞數量因細胞的生長速度而略有不同， 一般是保證第二天進行病毒感染的時候細胞匯合率介于 50%至70%之間。
（二）病毒感染
1.感染細胞Z佳MOI 的測定MOI（Multiplicity of Infection，感染復數）是指每個細胞感染的病毒數，通常MOI 越高，病毒整合到染色體的數量以及目的蛋白的表達量越高。對于分裂活躍的細胞，比如 Hela、293 細胞，MOI=1～3 時，80%以上的細胞均表達目的基因。而對于非分裂細胞，比如原代細胞，感染效率較低。需要進行MOI梯度摸索實驗，選擇適合的MOI 進行實驗。
2.感染步驟
按實驗需要將細胞鋪板（比如12孔板）；細胞數以第2天密度約50%為宜；37℃ 培養過夜。
對于Polybrene 可施加的細胞：準備*培養基和 Polybrene混合物，Polybrene 終濃度為摸索得到的Z適終濃度。移去培養基并添加 0.5 ml Polybrene/培養基混合物于每孔中（適用于24 孔板，其他孔板請相應調整體）。
對于不適用 Polybrene 的細胞，以上步驟省略，直接進入下面步驟：
感染前，從冰箱取出并在 37℃水浴中快速融化病毒，吸去人正常組織來源細胞原有培養基，將病毒原液加入細胞中，輕輕8字混勻。感染后第二天（約12小時），吸去含病毒的培養液，換上新鮮的*培養液，繼續37℃培養。感染后48小時，對于帶 GFP報告基因的病毒，可通過熒光顯微鏡觀測GFP表達效率，對于攜帶 Puromycin抗性基因的病毒，換上含適當濃度的 Puromycin 的新鮮*培養液，篩選穩定轉導的細胞株。

 EPOR 上調基因4抗體（C端）

 Eppin 山梨醇脫氫酶抗體

 EPS8 殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體

 EPX 色素上皮源性因子抗體

 ER/PR/c-erbB-2 Kit(mo monoclonal) 色氨酸羥化酶抗體

 ERAB 三葉肽因子3抗體

 ER-alpha 三葉肽因子2抗體

 ER-alpha 三羥酰輔酶A脫氫酶抗體

 ER-Alpha 三羥基*基輔酶A裂解酶抗體

 ER-Alpha 三羥基*基輔酶A還原酶抗體

 ER-alpha/beta 三羥基*基輔酶A合成酶2抗體

 ErbB-3/HER3 三羥基*基輔酶A合成酶1
人正常組織來源細胞