如何培養(yǎng)人正常組織來源細胞，養(yǎng)的更漂亮

1.不同的人正常組織來源細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。 這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。 有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。
2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作： 首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的） 其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入*培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。 如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。
3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。 這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些人正常組織來源細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。
10605-02-4    Palmatine hydrochloride    20mg/支    鹽酸巴馬汀
520-26-3    Hesperidin    20mg/支    橙皮苷
13241-33-3    Neohesperidin    20mg/支    新橙皮苷
此產(chǎn)品為柴胡皂苷B1和B2的混合體    Saikosaponin B    20mg/支    柴胡皂苷B
520-33-2    Hesperitin    20mg/支    橙皮素
1405-86-3    Glycyrrhizic acid    20mg/支    甘草酸
1449-05-4;471-53-4‏    Glycyrrhetinic acid    20mg/支    甘草次酸
53956-04-0    Glycyrrhizic acid ammonium salt    20mg/支    甘草酸單銨鹽
551-15-5    Liquiritin    20mg/支    甘草苷
5041-81-6    Isoliquiritin    10mg/支    異甘草苷
人正常組織來源細胞