骨髓細胞染色體標本的制備

一、原代細胞原理
骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者，特別是慢性或急性粒細胞性白血病，因為骨髓反映粒系統(tǒng)細胞增生情況，這些病人不宜用外周血。即
使是淋巴細胞性白血病，也不主張用外周血，因為加PHA刺激外周血培養(yǎng)，只能獲得正常淋巴細胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體
改變。
骨髓細胞屬不斷增殖的細胞，培養(yǎng)可分短期培養(yǎng)和直接制片法，無論哪種其培養(yǎng)液中均不需加PHA。
二、用品和試劑
同外周血染色體制備。
三、操作步驟
（一）短期培養(yǎng)法
1．取材、培養(yǎng)：從髂骨取骨髓液0.2—0.5ml，無菌注入裝有5ml培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中，37℃培養(yǎng)23—25小時后，加入秋水仙堿（終濃度為0.07μg/
ml），繼續(xù)培養(yǎng)3—4小時，收獲。
2．染色體制片：低滲、固定、制片及染色同實驗一。
（二）直接制備法
1．從髂骨抽取0.3—0.5ml，立即注入濃度為0.07μg/ml的秋水仙堿的生理鹽水5ml中，以吸管輕輕吸動，將骨髓中脂肪顆粒充分吸掉，1000rpm
離心8分鐘，棄上清。
2．加入同樣濃度的秋水仙堿生理鹽水2—3ml，室溫放置2—3小時，離心棄上清。
3．原代細胞染色體制片：低滲、固定、制片及染色同外周血染色體制備。
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