ATCC細胞血清培養(yǎng)方法

ATCC細胞的培養(yǎng)都是在DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加5~10的小牛血清(用于重組蛋白)或胎牛血清(用于雜交瘤)單抗來完成的，血清除了供給細胞的營養(yǎng)成分外，還能促進細胞開始合成DNA，對細胞的增殖有很大的作用。實驗證明，血清在細胞的體外培養(yǎng)中提供了細胞增殖所必需的生長因子。但哺乳動物的血清價格昂貴，成本高不適于今天的大規(guī)模工業(yè)化。而且哺乳動物血清作為補加物，存在許多問題，首先血清的來源存在問題，血清來源于特定的地區(qū)，因而如果該地區(qū)發(fā)生災(zāi)荒或牛群中流行疾病，都可導致血清失去供應(yīng)源。血清批量之間的差異大，重復性差，由于血清來源于動物，動物個體或群體的差異及時間上的差異都能導致每個批號的血清不*一樣。

ATCC細胞從重組蛋白的角度來看，出于Q和Qc的要求，每換一個批號的血清，都包含大量的驗證工作，這就給帶來很大的麻煩。另外血清來源于動物因此經(jīng)常被污染，污染的血清往往導致細胞生長緩慢，蛋白產(chǎn)量下降，甚至導致細胞死亡。目前購自各大公司的血清雖能消滅細菌和所有支原體，但很難保證除去所有的病毒污染。血清的成分十分復雜，經(jīng)研究表明，血清除含有促進生長的活性成分外，還含有一定的細胞毒性物質(zhì)和抑制物質(zhì)，對細胞有去分化作用，影響ATCC細胞功能的表達 血清復雜的成分也給基因工程表達產(chǎn)物的下游工作帶來很大的困難，因此成分明確，價格經(jīng)濟的無血清培養(yǎng)基成為CHO細胞培養(yǎng)的一種必然需求。