大鼠堿性磷酸酶（ALP）elisa試劑盒 返回列表頁

公司采用的全是進口原材料研，發靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。

實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數。
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樣品收集、處理及保存：
1）.細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
大鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒操作步驟：
1）運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發生加樣上的差錯。
2）依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3）參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
中心體蛋白2(CETN2)(酶聯免疫吸附試驗法)　97%　擬盤多毛孢　5g

中心體蛋白1(CETN1)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　根霉屬　1g

羧酸酯酶2(CES2)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　球孢白僵菌　5g

羧酸酯酶3(CES3)(酶聯免疫吸附試驗法)　97%　地衣芽孢桿菌　1g

糖合酶3(CHSY3)(酶聯免疫吸附試驗法)　97%　毛韌革菌　5g

封閉蛋白2(CLDN2)(酶聯免疫吸附試驗法)　95%　微球菌　100g

封閉蛋白5(CLDN5)(酶聯免疫吸附試驗法)　95%　產氣莢膜梭菌       毒素C型　25g

封閉蛋白16(CLDN16)(酶聯免疫吸附試驗法)　95%　根瘤菌　500g

封閉蛋白7(CLDN7)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　耐鹽四聯球菌　1g

封閉蛋白8(CLDN8)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　紫薇布勒酵母　250mg

封閉蛋白12(CLDN12)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　香菇　5g

封閉蛋白14(CLDN14)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　枯草芽胞桿菌枯草亞種　100g

Archain 1蛋白(ARCN1)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　極細枝孢　25g

羧肽酶A4(CPA4)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　嗜中溫寒冷桿菌　25g

羧肽酶A5(CPA5)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　弓形蟲(NT株)　5g

羧肽酶A6(CPA6)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　運動節桿菌　1g

羧肽酶D(CPD)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　短短芽孢桿菌　25g

羧肽酶N2(CPN2)(酶聯免疫吸附試驗法)　98%　根瘤菌　5g
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