大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）elisa試劑盒 返回列表頁(yè)

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　花楸盤多毛孢　5g

P物質(zhì)(SP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　Pseudomonas koreensis Kwon et al. 　1g

皮質(zhì)醇(Cortisol)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　蠟樣芽孢桿菌　500mg

尿調(diào)蛋白(UMOD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　巴斯德駒形氏酵母　5g

異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　巴西果小克銀漢霉　1g

N-乙酰神經(jīng)氨酰酸合酶(NANS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　根瘤菌　25g

4-羥基苯丙酮酸雙加氧酶(HPD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　綠毛殼擬毛梭孢變種　5g

碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>97.0%(GC)　枯草芽孢桿菌　1g

氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶溶酶體輔助蛋白2(ATP6AP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>97.0%(GC)　費(fèi)爾氏酵母　5g

芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　釀酒酵母　1g

白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　大毛霉　100g

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2(TNFαIP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　稻田彎曲嗜酸菌　25g

環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　朱黃籃狀菌　500g

Klothoβ蛋白(KLβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　膠孢炭疽菌　100g

脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　小孢根霉須狀變種　25g

N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　假單胞菌屬　5g

骨橋素(OPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥97%　新城疫病毒　25MG

70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　核盤菌　1g
大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)elisa試劑盒冰凍切片膽色素史汀（Stein）染色　OR51E2(Olfactory receptor 51E2) 　20 ul

石蠟切片膽色素格美林（Gmelin）染色　LY6G6F(Lymphocyte antigen 6 complex locus protein G6f) 　100 ul

冰凍切片膽色素格美林（Gmelin）染色　FCGBP(IgGFc-binding protein) 　100 ul

細(xì)胞中性脂質(zhì)尼羅紅染色　PIBF(Progesterone-induced-blocking factor) 　100 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)尼羅紅間接染色　HLA-E(HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain E) 　100 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)尼羅紅直接染色　MRC1(Macrophage mannose receptor 1) 　100 ul

冰凍切片中性脂質(zhì)尼羅紅染色　NARG2(NMDA receptor-regulated protein 2) 　20 ul

細(xì)胞中性脂質(zhì)蘇丹黑染色　PYY2(Putative peptide YY-2) 　100 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑間接染色　ZFAND6(AN1-type zinc finger protein 6) 　20 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑直接染色　MACC1(Metastasis-associated in colon cancer protein 1) 　100 ul

冰凍切片中性脂質(zhì)蘇丹黑染色　NMES1(Normal mucosa of esophagus-specific gene 1 protein) 　100 ul

細(xì)胞中性脂質(zhì)油紅O染色　IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) 　100 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O間接染色　AQP12A(Aquaporin-12A) 　100 ul

石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O直接染色　NLRC4(NLR family CARD domain-containing protein 4) 　100 ul

冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色　ZMAT3(Zinc finger matrin-type protein 3) 　20 ul

細(xì)胞總膽固醇高氯酸萘醌（PAN）染色　WNT5B(Protein Wnt-5b) 　100 ul
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。