耐久腸球菌(堅韌鏈球菌) 返回列表頁

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

FSH 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-L1CAM Antibody小鼠組蛋白H2b（histon-H2b）elisa定量檢測試劑盒

LH 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-LAIR2 Antibody小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類（MHCⅠ/H-2Ⅰ）elisa定量檢測試劑盒

PRL 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-LAMA4 Antibody小鼠肝核因子1α（HNF1a）elisa定量檢測試劑盒

魚雌二Anti-LAMA5 Antibody小鼠白介素18結合蛋白（IL18BP）elisa定量檢測試劑盒

大鼠Bcl-2相關X蛋白Anti-LAMA1 Antibody小鼠糖原合成激3α（GSK3a）elisa定量檢測試劑盒

兔子腫瘤壞死因子αAnti-LAMB1 Antibody小鼠L苯解氨（PAL）elisa定量檢測試劑盒

小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-LAMB2 Antibody小鼠基質金屬蛋白3（MMP-3）elisa定量檢測試劑盒

人胸腎表達趨化因子Anti-LAMB3 Antibody小鼠IgG Fc片段（IgG-Fc）elisa定量檢測試劑盒

耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)1,1'-聯(lián)萘酚-2,2'-雙(三氟磺酯)  98%Anti-SLC24A5  可溶性載質轉運蛋白SLC24A5抗體小鼠普通轉錄因子IIH多肽1(GTF2H1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

二膦 95%Anti-Slc26a5  Slc26a5抗體小鼠饑餓素(GHRL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(R)-(-)-5,5'-雙[二(3,5-二叔丁-4-氧)]-4,4'-二-1,3Anti-SLC6A19  依賴鈉鈣交換蛋白6小鼠神經(jīng)膠質成熟因子β(GMFB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(S)-DTBM-SEGPHOS 98%Anti-SLC16A3/MCT-4  MCT4抗體小鼠膠質系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1H-咪唑-4- 98%Anti-Smac/DIABLO  線粒體促凋亡蛋白抗體小鼠神經(jīng)膠質纖維性蛋白(GFAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

三氟磺酐 98%Anti-SLC33A1  乙酰輔A轉運蛋白1抗體小鼠胰高血糖素(GC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

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鄰二酚-O，O′-二乙 97%Anti-Slit2/Slil3  神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體小鼠糖皮質激素受體β(GRβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

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2-氧溴乙烷 98%Anti-SLC39A6  SLC39A6抗體小鼠糖蛋白130(gp130)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

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代正烷 99%Anti-SLC40A1/FPN1  膜鐵轉運蛋白SLC40A1抗體小鼠葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

代正烷 分析標準品,≥99.8% (GC)Anti-SLC44A1/CD92  溶質轉運蛋白家族44成員1抗體小鼠葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

代仲丁烷 99%Anti-Smad1  信號轉導分子Smad-1抗體小鼠葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒