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當前位置：上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 大鼠雪旺氏細胞
| 貨號 | GOY-01X1040 |
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使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 大鼠雪旺氏細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1040 |
商品介紹：
名稱 大鼠雪旺氏細胞 2.組織來源：神經(jīng)組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠雪旺氏細胞分離神經(jīng)組織；周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質細胞稱施萬（schwann，又名雪旺細胞）細胞，它沿神經(jīng)元的突起分布。施萬細胞包裹在神經(jīng)纖維上，這種神經(jīng)纖維叫有髓神經(jīng)纖維。有髓神經(jīng)纖維和無髓神經(jīng)纖維的施萬細胞的形態(tài)和功能有所差異，施萬細胞的外表面有基膜，能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子，促進受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生，參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形，其長軸與軸突平行，核周有少量胞質。由于施萬細胞包在軸突的外面，故又稱神經(jīng)膜細胞（neurilemmalcell），它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經(jīng)膜（neurilemma），光鏡下可見此膜。在有髓神經(jīng)纖維發(fā)生中，伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝，軸突位于縱溝內，溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜（mesaxon）。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突，把胞質擠至細胞的內、外邊緣及兩端（即靠近郎氏結處），從而形成許多同心圓的螺旋膜板層，即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜，屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質除見于細胞的外、內邊緣和兩端外，還見于髓鞘板層內的施－蘭切跡。該切跡構成螺旋形的胞質通道，并與細胞外、內邊緣的胞質相通。 5.方法簡介： ()實驗室分離的大鼠雪旺氏細胞采用-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的大鼠雪旺氏細胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R111 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)雙極、多極形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
酵母粉葡萄糖瓊脂（YDC） Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Microfibrillar-associated protein 5
1g Lactulose 室溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Islet amyloid polypeptide
50T 麻疹病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存 0.312-2
大鼠雪旺氏細胞1瓶 HT-29細胞株 HT-29 低溫運輸和保存
50T 口蹄疫病毒A亞型PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
100uL 潮抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pEF1/myc-His A pEF1/myc-His A 低溫運輸，-20℃保存
mEC肉湯 mE.Coli Broth 250g
5mL 上皮細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
2 ug pMXB10 pMXB10 低溫運輸，-20℃保存
實驗用對照生化管 20支/盒
1mg 金黃色葡萄菌 V8 蛋白 Protease，Staph aureus V8 4℃保存
SLT/SLT-IIe/O139 豬水素(O139)菌體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PFKFB2 果糖-2,6-二磷酸心肌抗體 規(guī)格: 0.2ml
HEC1 細胞高表達蛋白Hec1抗體 規(guī)格: 0.2mlDCAF12/WDR40A 睪中心體相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
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