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    當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 椎間盤纖維環(huán)細胞

    椎間盤纖維環(huán)細胞

    參  考  價面議
    具體成交價以合同協(xié)議為準

    產(chǎn)品型號

    品       牌其他品牌

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

    所  在  地上海市

    更新時間:2022-05-19 12:44:43瀏覽次數(shù):188次

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    細胞培養(yǎng)
    貨號 GOY-01X1210
    椎間盤纖維環(huán)細胞公司正在出售的產(chǎn)品:細胞甲羥戊酸(mevalonate)含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測試劑盒 20次
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    通用性5-磷酸甲羥戊酸

    使用方法:

    收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

    2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

    3. 細胞傳代

    1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

    2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

    3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

    4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

    公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

    產(chǎn)品名稱

    椎間盤纖維環(huán)細胞

    規(guī)格

    5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

    分類

    原代細胞

    貨號

    GOY-01X1210

    商品介紹:

    名稱 椎間盤纖維環(huán)細胞

    2.組織來源:椎間盤組織

    3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

    4.細胞簡介:

    椎間盤纖維環(huán)細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶,后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內(nèi)層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。

    5.方法簡介:

    ()實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)細胞采用膠原酶-中性聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

    6.質(zhì)量檢測:

    ()實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)細胞經(jīng)型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    7.培養(yǎng)信息:

    培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    產(chǎn)品貨號CM-H174

    換液頻率每2-3天換液一次

    生長特性貼壁

    細胞形態(tài)梭形、多角形

    傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

    消化液0.25%

    培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

    培養(yǎng)操作:

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

    1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

    3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
    圖片13.jpg

    細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

    1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

    二.細胞處理:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

    50T 阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)   低溫運輸,-20℃保存

    1mL 亮抑蛋白肽溶液,10 mg/mL Leupeptin Solution 4℃保存一周,-20℃保存6個月

    2 ug pUC118 pUC118 低溫運輸,-20℃保存

    24次 凋亡DNAout Apoptotic DNAOUT -20℃保存

    2 ug p3×FLAG-CMV-14 p3×FLAG-CMV-14 低溫運輸,-20℃保存

    含糖牛肉湯培養(yǎng)基 Beef Broth Medium(wi?嵌?L?

    椎間盤纖維環(huán)細胞NUCKS1  核酪蛋白激和細胞周期蛋白依賴性激底物1抗體 規(guī)格: 0.2mlTSSK6/CT72  睪特異/激6抗體 規(guī)格: 0.2ml

    CHCHD2  丙型NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    MUC13  粘蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2mlPAGE4/GAGE9  前列相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GPA/GYPA/CD235a  型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

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