分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室電泳儀的方法

TSZelisa試劑盒是分子生物學(xué)研究*的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳大類，自由界面電泳不需支持物，如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。區(qū)帶電泳需用各種類型的物質(zhì)作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。應(yīng)用電泳法可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析，或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀(北京六一儀器廠)為例介紹其使用方法。

1.使用方法

(1)按電源開關(guān)，顯示屏出現(xiàn)“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后，同時系統(tǒng)初始化，蜂鳴4聲，設(shè)置常設(shè)置。屏幕轉(zhuǎn)成參數(shù)設(shè)置狀態(tài)，見圖一：

U: 0V U＝ 100V ｜ Mode： STD

I: 0mA I ＝ 50mA ｜

P: 0W P＝ 50W ｜

T: 00:00 T＝ 01:00 ｜

其中:左側(cè)大寫U: I: P: T: 為電泳時實(shí)際值;中間部分顯示程序的常設(shè)值(預(yù)置值)。Mode(模式)：STD(標(biāo)準(zhǔn));TIME(定時);VH(伏時);STEP(分步)

(2)設(shè)置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如，要求工作電壓U=1000V，電流I限制在200mA以內(nèi)，功率W限制在100W以內(nèi)，時間T為3小時20分，并且到時間自動關(guān)掉輸出。則操作步驟如下：

①按“模式”鍵，將工作模式由標(biāo)準(zhǔn)(STD)轉(zhuǎn)為定時(TIME)

模式。每按一下模式鍵，其工作方式按下列順序改變： STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先設(shè)置電壓U，按“選擇”鍵，先將其反顯，然后輸入數(shù)字鍵即可設(shè)置該參數(shù)的數(shù)值。按數(shù)字1000,則電壓即設(shè)置完成。

③設(shè)置電流I，按“選擇”鍵，先使I反顯，然后輸入數(shù)字200。

④設(shè)置功率P，按“選擇”鍵，先使P反顯，然后輸入數(shù)字100。

⑤設(shè)置時間T，按“選擇”鍵，先使T反顯，然后輸入數(shù)字320。如果輸入錯誤，可以按“清除”鍵，再重新輸入。

⑥確認(rèn)各參數(shù)無誤后，按“啟動”鍵，TSZelisa試劑盒啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示Start! 并蜂鳴4聲，提醒操作者電泳儀將輸出高電壓，注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設(shè)置值。同時在狀態(tài)欄中顯示“Run”，并有兩個不斷閃爍的高壓符號，表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄下方，顯示實(shí)際的工作時間(到秒)。

⑦每次啟動輸出時，儀器自動將此時的設(shè)置數(shù)值存入“MO”號存儲單元。以后需要調(diào)用時可以按“讀取”鍵，再按“0”鍵，按“確定”鍵，即可將上次設(shè)置的工作程序取出執(zhí)行。

⑧電泳結(jié)束，儀器顯示：“end”，并連續(xù)蜂鳴提醒。此時按任一鍵可止鳴。

2.注意事項(xiàng)

(1)U、I、P三個參數(shù)的有效輸入范圍是：U：5～3000V;I： 4～400mA;P：4～400W.

(2)一般情況下，當(dāng)No Load!時，首先應(yīng)關(guān)機(jī)檢查電極導(dǎo)線與電泳槽之間是否有接觸不良的地方，可以用萬用表的歐姆檔逐段測量。

(3)如果輸出端接多個電泳槽，則儀器顯示的電流數(shù)值為各槽電流之和，此時應(yīng)選擇穩(wěn)壓輸出，以減小各槽的相互影響。

(4)注意保持儀器的清潔，不要遮擋儀器后方進(jìn)風(fēng)通道。嚴(yán)禁將電泳槽放在儀器頂部，避免緩沖液灑進(jìn)儀器內(nèi)部。

(5)本儀器輸出電壓較高，使用中應(yīng)不避免接觸輸出回路及電泳槽內(nèi)部，以免發(fā)生危險。

(6)長期不用TSZelisa試劑盒儀器，應(yīng)放置在干燥通風(fēng)的清潔環(huán)境中保存。