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    初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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    TSZelisa試劑盒*化的包被條件

    時(shí)間:2017-6-21閱讀:224
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    1.TSZelisa試劑盒包被抗原的選擇 
    包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采 用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子 抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。  
    2.包被液的選擇 
    一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,TSZelisa試劑盒也可以使用pH7.2的磷酸 鹽緩沖液。 
    3.包被溫度的選擇 
    通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時(shí),建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。  
    4.包被濃度的選擇 
    包被的適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對(duì)特定包 被抗原的適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定。  
    包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?  
    封閉是否必要,取決于TSZelisa試劑盒的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌*,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測(cè)定中,封閉一般是*的。

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