Y190 感受態細胞100ul使用說明

Y190 感受態細胞100ul使用說明：

1． Y190 感受態細胞100ul*10品牌取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3． 42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5． 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

培養方法：

Y190 感受態細胞100ul*10品牌收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況，如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml培養液繼續培養。

培養實驗又要開始了，科研工作者又該忙碌了，大家可能都在尋找適合自己的細胞，不用急，我們幫您掌舵，讓您滿意！

傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉，加培養基混勻分瓶，T25瓶中加培養基至6-8ml，T75瓶加培養基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養。