大鼠P選擇素(P-Selectin)elisa試劑盒操作步驟

大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒操作步驟:

1.         標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在、第二孔中分別加標準品100μl，然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.     測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

BAF53b肌動蛋白樣蛋白6B抗體

Ataxin 7脊髓小腦共濟失調蛋白7抗體

APBA1β淀粉樣前體蛋白結合蛋白1抗體（X11α）

Apolipoprotein E載脂蛋白E抗體

AFP甲胎蛋白AFP抗體

AE2陰離子交換蛋白2抗體

Aconitase 1鐵調節蛋白1抗體

ATAD3A三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體

APOJ載脂蛋白J抗體

APOH載脂蛋白H抗體

ART4二磷酸腺苷核糖基轉移酶4抗體

AKIRIN2AKIRIN2蛋白抗體

ARL8BADP核糖基化樣因子8B抗體

ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體

AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗體

ASZ1錨定蛋白樣蛋白1抗體

Adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗體

AIM1L黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體

AER61未知糖基化轉移酶AER61抗體

FE65鐵蛋白Fe65抗體