土壤β-葡萄糖苷酶（β - GC）操作步驟

土壤β-葡萄糖苷酶（β - GC）操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

自身抗原抗體EDC4抗體

E3泛素蛋白連接酶EDD抗體

胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體

轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

內(nèi)皮脂肪酶抗體

MYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體

烯脂酰輔酶A水解酶抗體

磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體

三羥酰輔酶A脫氫酶抗體

限制過度增殖相關(guān)蛋白EML4抗體

ETS1相關(guān)蛋白2抗體

EFHA1蛋白抗體

磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

EFHC1蛋白抗體

EFHC2蛋白抗體

EFHD1蛋白抗體

突觸結(jié)合蛋白2抗體

核苷酸焦磷酸酶2抗體

長鏈烯脂酰輔酶A水化酶抗體

神經(jīng)元，肌肉特異性烯醇化酶抗體

內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體