著絲粒蛋白抗體ZW10的生物素化標記實驗要點

著絲粒蛋白抗體ZW10的生物素化標記實驗要點：
1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合；
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用；
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

血管緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體
膜粘連蛋白2受體抗體
血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體
拮抗凋亡轉錄因子抗體
α-1抗胰糜蛋白酶抗體
α-1抗胰蛋白酶抗體
ATP結合蛋白家族6抗體
三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗體
脂聯素受體2抗體
ANGEL1蛋白抗體
ANGEL2蛋白抗體
ANKLE2蛋白抗體
特異性錨樣蛋白1抗體
錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體
錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體
錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體
錨蛋白重復結構域蛋白22抗體
錨蛋白重復結構域蛋白50抗體
氫離子轉運ATP合成酶6G抗體
錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體
芳香基硫酸酯酶K抗體
神經元突觸前膜蛋白抗體
錨定蛋白G抗體
肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體