elisa定量檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配置

elisa定量檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn)，把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢海?） ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液（2） ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（2） ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（3） ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液;（4）ELISA實(shí)驗(yàn)終止液（5）ELISA底物緩沖液（6）ELISA實(shí)驗(yàn)TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液（7） ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液（8）ELISC。

試劑

（1） ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:

NaHCO3    1.59克

NaHCO3 2.93克

加蒸餾水至1000ml

（2）elisa定量檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M

KH2PO4   0.2克

Na2HPO4·12H2O 2.9克

NaCl   8.0克

KCl 0.2克

Tween-20 0.05%  0.5ml

加蒸餾水至1000ml

（3） ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液：

牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

（4） ELISA實(shí)驗(yàn)終止液（2M H2SO4）：

蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。

（5） ELISA底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:

0.2M Na2HPO4（28.4克/L）              25.7ml

0.1M 檸檬酸（19.2克/L） 24.3ml

加蒸餾水50ml。

（6） ELISA實(shí)驗(yàn)TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:

TMB（10mg/5ml無水乙醇）   0.5ml

底物緩沖液（PH5.5）   10ml

0.75%H2O2                           32μl

（7） ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:

ABTS 0.5mg

底物緩沖液（PH5.5）    1ml

3%H2O2                          2μl

（8）ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液：

牛血清白蛋白（BSA） 5克

加洗滌緩沖液至100ml。

值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長期保存。

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為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要，將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的elisa定量檢測試劑盒混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔，嚴(yán)防交叉污染。