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    技術(shù)文章

    正確操作小鼠ELISA試劑盒的步驟

    閱讀:171發(fā)布時(shí)間:2017-7-17

    小鼠ELISA檢查試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。

     

    小鼠ELISA檢查試劑盒操作過(guò)程:
    1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩下板條用自封袋密封放回4℃。
    2. 設(shè)置規(guī)范品孔、樣本孔和空白孔,空白孔啥都不加;規(guī)范品孔各加不一樣濃度的規(guī)范品50μL;
    3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加*40μL;
    4. 隨后規(guī)范品孔和樣本孔中(空白孔不加)參加辣根過(guò)氧化物酶(HRP)符號(hào)的檢查抗體100μL,,用封板膜封住反響孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
    6. 一切孔參加底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7. 一切孔參加停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。


    小鼠ELISA檢查試劑盒操作注意事項(xiàng):試劑盒保留在2-8℃,運(yùn)用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運(yùn)用;試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保留;濃度為0 的S0 號(hào)規(guī)范品即可視為陰性對(duì)照或許空白;依照闡明書(shū)操作時(shí)樣本現(xiàn)已稀釋5 倍,zui終成果乘以5 才是樣本實(shí)踐濃度;嚴(yán)厲依照闡明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。一切液體組分運(yùn)用前充沛搖勻。

     


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