ELISA試劑盒樣本與實驗的重要性

ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附法，是一種常用的固相酶免疫測定辦法。 由于ELISA辦法簡略，便利，活絡(luò)，特異性強且不需求特別設(shè)備（只需求酶標(biāo)儀就可以），所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。
可是影響ELISA測定的要素有很多，而其操作中需求有一定的技能請求，如操作辦法，環(huán)境，樣本等，有時常可見到一些錯誤成果（即假陽性或假陰性）等，樣本的重要性關(guān)系到全部試驗的成果，上海極威生物為我們解讀ELISA檢查的影響要素之一-樣本的影響
1、ELISA試劑盒樣本的保留：在冰箱中保留過久的標(biāo)本，在間接法ELISA測定中會致使本底過深、會構(gòu)成假陽性；為防止上述問題，在測定血清標(biāo)本時能新鮮收集；假如不能當(dāng)即測定，依據(jù)相應(yīng)的時刻保留相應(yīng)的溫度，5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)-20℃低溫凍存；如凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)有些濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不行強烈振動。
2、樣本的時刻：由于塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，所以樣本長時刻放在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量降低構(gòu)成假陰性。的辦法是運用真空*；并運用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會添加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA體系中辣根過氧化物酶活性。
3、樣本受細(xì)菌污染：因菌體中可能會含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因而，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，可能會發(fā)生非特異性顯色而干擾測定成果。
4、ELISA試劑盒樣本的凝結(jié)：樣本凝結(jié)不全。在試驗中，有的時分心急為了爭取時刻快速檢查，在血液還未開端凝結(jié)的時分就強行離心別離血清，致使血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測定過程中構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊，易構(gòu)成假陽性成果；因而血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清。
5、ELISA試劑盒樣本溶血：溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清選用ELISA法檢查易發(fā)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗刷過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），然后催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，發(fā)生假陽性［2］。所以嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。