不同類型的樣本的處理方法

一般咱們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或安排勻漿液等，不一樣類型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。準確的處理樣本是確保ELISA檢測的準確性和準確性的*步。ELISA試劑盒
1、血清
血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單。用無熱原、無內毒素的試管或離心管搜集血液標本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃一個晚上，使血清分出。（將試管或離心管歪斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的分出。）4℃ 1000×g離心20分鐘，細心搜集上清。主張將血清分裝多份，-20℃或-80℃保留，防止重復凍融。
采血過程中應防止溶血，由于紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質，在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色，而致使檢測的不準確性。一起也應防止細菌污染，由于菌體內也許富含內源性的HRP然后致使檢測的假陽性。
2、血漿
用含抗凝劑的*或離心管搜集血液標本，標本搜集后30min內4℃ 1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保留，防止重復凍融。防止使用溶血或高血脂的標本。常用的抗凝劑為EDTA、*和*等，檢測時還應細心閱讀試劑盒說明書，查看試劑盒是不是對抗凝劑有特殊要求。ELISA試劑盒
3、細胞培養上清
取細胞培養上清到離心管，1000×g離心20min，除掉細胞碎片及雜質，取上清，-20℃或-80℃保留，防止重復凍融。
4、細胞裂解液
1）吸去培養板內的培養基，用*消化細胞，加恰當培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省掉。
2）搜集細胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養基，用預冷的PBS潤洗3次。
3）參加恰當的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前參加蛋白酶按捺劑）重懸細胞。一般6孔板一個孔的細胞量需求150~250μL PBS重懸。
4）將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫凍結樣品，重復凍融幾回，使細胞充沛裂解。也可將樣品進行超聲破碎，以到達裂解的意圖。
5）4℃ 10000×g 離心10min，除掉細胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保留，防止重復凍融。
5、安排勻漿液
1）將安排樣本用PBS (0.01 [錨點] [錨點] M, PH 7.4) 沖刷，洗去安排外表殘留的血液或雜質。
2）將安排塊稱重，記載后剪碎，碎塊應盡量小，便于勻漿得更充沛
3）將安排按必定的份額參加預冷的PBS（臨用前參加蛋白酶按捺劑）勻漿，勻漿時置于冰上或冰浴中。（一般按安排分量：PBS體積=1:9的份額勻漿，例如1g的安排樣本對應9mL的PBS，詳細體積可根據試驗需求恰當調整，檢測后核算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數）
4）吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保留，防止重復凍融。
6、尿液、唾液等別的液體生物樣本
1000×g離心20min，取上清即可檢測。
總的來說，由于ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量，所以應確保一切樣本均為弄清的液體，沉積或懸浮物都應離心去掉。ELISA試劑盒為了確保檢測的準確性，保留于-20℃或-80℃的樣本在1~6個月內檢測；4℃保留的樣本應在1周內進行檢測。別的，還應確保樣本不含NaN3，由于NaN3會按捺HRP的活性，然后致使假陰性的成果。