ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中遇到的各種疑問

現(xiàn)在ELISA試劑盒仍在研討傍邊占有著干流位置，ELISA試劑盒的遍及使用使得試驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和，ELISPOT技能的長處也決定了它的開展?jié)摿ΑISPOT法來源于ELISA，相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破，是定量ELISA技能的延伸和開展。因?yàn)橛坞x的循環(huán)抗體或CK的半哀期不一樣，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官，傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能切當(dāng)?shù)姆从丑w內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代，國外的科研工作者依據(jù)ELISA技能的基本原理，建立了體外檢查特異性抗體排泄細(xì)胞和CK排泄細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技能(ELISPOT)。
ELISA試劑盒試驗(yàn)過程中遇到的各種疑問：
1，水質(zhì)因素：點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證，用娃哈哈礦泉水替代
2，試驗(yàn)操作因素
吸取到其它相吹干，的取液吹干
離心不*，延伸離心時(shí)刻
樣本的污染，替換樣本
乳化未處理*，溫浴（70℃）處理乳化現(xiàn)象
3，儀器試劑因素
離心管未清潔干凈，的洗刷用具
有機(jī)溶劑的影響，ELISA試劑盒做試劑空白看影響成果
4，衍生化試劑因素（長時(shí)刻衍生化試劑蛻變）,替換衍生化試劑
5，與曲線好壞有關(guān),，確保曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本自身就是陽性樣本，換陰性樣本做回收率
空白管在試驗(yàn)中被污染，試驗(yàn)中避免穿插污染
水質(zhì)因素用，娃哈哈礦泉水替代
2.偏 高
增加量不，的增加量
增加濃度不適合，增加適宜的濃度
取液吹干量多，的取液吹干 
取到其它相層液體，取需用相吹干
復(fù)溶液未稀釋或參加量少，的稀釋復(fù)溶液
3.偏 低
增加量不，的增加量
增加濃度不適合，增加適宜的濃度
取液吹干量少，的取液吹干
復(fù)溶液稀釋過錯(cuò)或參加量多，的稀釋復(fù)溶液