ELISA試劑盒吸光度測定值

  ELISA試劑盒測定疫苗抗體之如何處理實驗數據。此時測得的吸光度即為臟物的吸光度值。zui后酶標儀給出的數值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。因此，雙波長比色測定具有能排除由微滴板本身、板孔內標本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對特異顯色測定吸光度的影響的優點。由于ELISA試劑盒測定中單個空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性，也就是說每次測定或同次測定空白孔位置的不同均有可能得到不同，故而在ELISA試劑盒測定比色時，是使用雙波長比色。
  ELISA試劑盒做得很好的話批間CV都要有10～15％左右，用同一個抗原，但對于包被的抗原濃度對OD的影響不是很大，只要不是差別太大即可。抗血清當然要用同一個稀釋度了。另外比較的話就必每批，每塊板上的樣品都要伴隨著一個參比品一同做，參比品還是同一個這樣才能保證實驗結果的可比性。1） 高結合力
  此種酶標板，表面經處理后，其蛋白結合能力大大增強，可達300~400ng IgG/cm2，主要結合的蛋白分子量＞10kD。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，ELISA試劑盒不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。
2) 中結合力
   此類酶標板經表面疏水鍵被動與蛋白結合，適合作為分子量＞20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
3)氨基化
   ELISA試劑盒這種酶標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值，ELISA試劑盒其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的能力，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。