ELISA試劑盒實驗之試劑配置

ELISA試劑盒被廣泛運用與各大實驗中，其中關(guān)于實驗中緩沖溶液等試劑的配制可能對實驗新手來說還是個很大的困擾。
試劑
(1)　ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2)　ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M
KH2PO4 　　　　   　0.2克
Na2HPO4·12H2O　　2.9克
NaCl　　　　　   　　8.0克
KCl　　　　　　　 　0.2克
Tween-20　0.05%　  0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3)　ELISA實驗稀釋液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
(4)　ELISA實驗終止液(2M　H2SO4)：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5)　ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L)　　　　　 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6)　ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5)　　　   10ml
0.75%H2O2                           32μl
(7)　ELISA實驗ABTS使用液:
ABTS　　　　　　　　0.5mg
底物緩沖液(PH5.5)　    1ml
3%H2O2                          2μl
(8)ELISA實驗封閉液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
為了保證ELISA試劑盒實驗的準確性，實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要，將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔，嚴防交叉污染。