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    ELISA試劑盒包被用緩沖液及Z適包被抗原濃度的優化

    時間:2014/1/3閱讀:940
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         ELISA試劑盒包被緩沖液的優化
         包被抗原時,為了得到*的包被效果,我們采用了碳酸鹽緩沖液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩沖液(50mM ph7.6)、以及TRIS鹽酸緩沖液(50 mM ph7.6)三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動酶標儀分析,選擇*的包被緩沖液系統(表5)。同時為了保證緩沖液能夠長期保存,我們在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。
         ELISA試劑盒zui適抗原包被濃度的優化
         用優化好的包被緩沖液,將包被抗原(ALB)稀釋成0.1ug/ml,1.0ug/ml,2.0ug/ml,4.0 ug/ml,6.0 ug/ml,8.0 ug/ml,10.0 ug/ml等六個濃度,包被微孔板,每孔100ul;競爭抗原濃度為4.0 ug/ml,2.0 ug/ml;酶標抗體稀釋度為1:300,經孵育、顯色、終止后用自動酶標儀分析(表6)。顯色的強度在一定范圍內與包被的抗原量成正比,但隨著包被抗原濃度的增加,顯色的強度反而降低,我們選擇臨界包被值作為包被抗原量。

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