ELISA試劑盒免疫反應(yīng)條件研究

   在免疫反應(yīng)條件的優(yōu)化，百威啤酒間接競(jìng)爭(zhēng)法和直接競(jìng)爭(zhēng)方法，檢測(cè)限分別為0。005／ 0。01／，測(cè)定的線性范圍分別為0。005 ~ 10／和0。01 5 10／，并ELISA試劑盒在此基礎(chǔ)上，開(kāi)發(fā)了檢測(cè)的兩種試劑盒，水，土壤，植物，該酶中毒樣品，重現(xiàn)性好的試劑盒，批號(hào)和變異系數(shù)均小于8%，試劑盒檢測(cè)精度高，除了吐樣品，樣品回收率大于89。62%。
   在這項(xiàng)研究中，2，3 -二- 2 - 7 - 2 -二氫，甲基苯并呋喃甲酸合成了兩個(gè)半抗原百威啤酒為基礎(chǔ)，這6 -（2，3 -二- 2 2 -二氫，甲基－7－苯并呋喃基氧）羰基]氨基]己酸和4”（2，3 -二- 2 - 7 - 2 -二氫，甲基苯并呋喃基氧）羰基]氨基]丁酸。用合成的百威啤酒免疫兔獲得高滴度，用間接法測(cè)定抗多克隆抗血清的效價(jià)的特異性百威啤酒1:16000，~ 1:128000，1:500000 ~ 1:4000000純化的抗體效價(jià)。而ELISA試劑盒選擇的純化抗體和辣根過(guò)氧化物酶共軛體系的收入-免疫家兔制備酶標(biāo)記抗體，并測(cè)定酶活性的抗體，滴度1:4000。交叉反應(yīng)所得的百威啤酒抗血清和丁硫克百威啤酒率6。19%，和呋喃酚的交叉反應(yīng)率為4%，與其他5種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的交叉反應(yīng)均小于0。44%，低于三種有機(jī)磷農(nóng)藥的交叉反應(yīng)率0。12%。同時(shí)，根據(jù)特定的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的原理，對(duì)小鼠百威啤酒中毒的解毒克抗百威啤酒抗體的進(jìn)一步研究，試驗(yàn)結(jié)果表明，該抗體能更好地緩解百威啤酒對(duì)乙酰*酯酶抑制小鼠的中毒癥狀，逐漸恢復(fù)正常。同時(shí)，這兩種半抗原與載體蛋白牛血清白蛋白和卵清蛋白偶聯(lián)克百威啤酒免疫原和包被抗原，并對(duì)的百威啤酒與載體蛋白偶聯(lián)物的結(jié)合率測(cè)定的紫外分光光度法。