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    內(nèi)皮細(xì)胞 ,RF/6A細(xì)胞細(xì)胞 )

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    更新時(shí)間:2016-06-06 09:47:28瀏覽次數(shù):227次

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    內(nèi)皮細(xì)胞 ,RF/6A細(xì)胞細(xì)胞 ) ,公司貼壁細(xì)胞、 懸浮細(xì)胞、復(fù)蘇細(xì)胞、凍存細(xì)胞提供,全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格品牌銷(xiāo)售。

    磺胺(熔點(diǎn)166℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100096-199404
    茴香酸(熔點(diǎn)185℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100097-199402
    內(nèi)皮細(xì)胞  ,RF/6A細(xì)胞細(xì)胞 ) *(熔點(diǎn)200℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100098-200804
    雙氰胺(熔點(diǎn)℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光10099-199402
    糖精(熔點(diǎn)229℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100100-200804 
    ATCC細(xì)胞株的品質(zhì),內(nèi)皮細(xì)胞  ,RF/6A細(xì)胞細(xì)胞 ) 國(guó)內(nèi)細(xì)胞的價(jià)格。對(duì)于初做細(xì)胞培養(yǎng)研究的工作者來(lái)說(shuō),會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,公司在細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題方面做了些總結(jié),希望對(duì)你們能有所幫助。
    內(nèi)皮細(xì)胞 ,RF/6A細(xì)胞細(xì)胞 ) 培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對(duì)。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細(xì)菌、酵母或真菌污染。
    按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴(lài)CO2培養(yǎng)液,松開(kāi)瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
    【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來(lái)。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動(dòng)使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
    【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時(shí)pH 發(fā)生變化】細(xì)菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

    【培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁】*消化過(guò)度;支原體污染;培養(yǎng)液中無(wú)貼壁因子,縮短*消化時(shí)間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。

    【懸浮細(xì)胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過(guò)度消化使得細(xì)胞裂解釋放DNA,用無(wú)鈣鎂*洗滌細(xì)胞,輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細(xì)胞。
    【原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
    【培養(yǎng)細(xì)胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大。細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
    【培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如*或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。試劑保存不當(dāng)。
    比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。
    1)增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。
    2)讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
    3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
    4)補(bǔ)加*或生長(zhǎng)因子。
    5)用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物。或用抗生素除菌。
    6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
    8)接種細(xì)胞起始濃度太低,細(xì)胞已老化,支原體污染。
    9)增加接種細(xì)胞起始濃度。
    10)換用新的保種細(xì)胞。
    11)分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
    *含量測(cè)定50mg常溫,避光100089-200301
    雙羥萘酸含量測(cè)定50mg常溫,避光100090-200301
    *含量測(cè)定100mg常溫,避光100091-199601
    *(熔點(diǎn)℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100093-200804
    乙酰苯胺(熔點(diǎn)116℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100094-200204
    *(熔點(diǎn)℃)熔點(diǎn)對(duì)照品1g常溫,避光100095-200204
     

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