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    大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒

    時間:2013-8-5閱讀:270
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      上海博研生物科技有限公司
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    本試劑盒僅供研究使用。
    檢測范圍:                                                          96T
    1μmol/L - 32μmol/L
     
    使用目的:
    本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中一氧化氮合成酶(NOS)含量
    實驗原理
    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)水平。用純化的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS)再與HRP標記的一氧化氮合成酶(NOS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)濃度。
    大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒試劑盒組成

    1
    30倍濃縮洗滌液
    20ml×1瓶
    7
    終止液
    6ml×1瓶
    2
    酶標試劑
    6ml×1瓶
    8
    標準品(64μmol/L)
    0.5ml×1瓶
    3
    酶標包被板
    12孔×8條
    9
    標準品稀釋液
    1.5ml×1瓶
    4
    樣品稀釋液
    6ml×1瓶
    10
    說明書
    1份
    5
    顯色劑A液
    6ml×1瓶
    11
    封板膜
    2張 
    6
    顯色劑B液
    6ml×1/瓶
    12
    密封袋
    1個

    標本要求
    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步驟
    1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    32μmol/L
    5號標準品
    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
    16μmol/L
    4號標準品
    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
    8μmol/L
    3號標準品
    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
    4μmol/L
    2號標準品
    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
    2μmol/L
    1號標準品
    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

    2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
    4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
    5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    7.         溫育:操作同3。
    8.         洗滌:操作同5。
    9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
     
    大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒計算
      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
    注意事項
    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
    4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
    大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:;2-8℃。
    2.有效期:6個月

    大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒部分推薦產品:

    Anti-BRAF/FITC  熒光素標記黑素瘤相關蛋白抗體IgG
    Anti-BRCA1(human)/FITC  熒光素標記乳腺癌易感基因1抗體(人)IgG
    Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC  熒光素標記乳腺癌易感基因1抗體(小鼠 大鼠)IgG
    Anti-BRCA2/FITC  熒光素標記乳腺癌易感基因2抗體IgG
    Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine)  熒光素標記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG
    Anti-BrdU/FITC  熒光素標記溴脫氧
    尿苷抗體IgG
    Anti-Brg1/FITC  熒光素標記新的抑癌基因Brg1抗體IgG
    Anti-BRMS-1/FITC  熒光素標記乳腺癌轉移抑制基因1抗體IgG
    Anti-BTG2/TIS21/FITC  熒光素標記B細胞遷移基因2抗體IgG
    Anti-Brucella/FITC  熒光素標記抗布魯氏菌抗體IgG
    Anti-Brucella/HRP  辣根過氧化物酶標記抗布魯氏菌抗體IgG
    Anti-Brucella/Biotin  *標記抗布魯氏菌抗體IgG
    Anti-BSEP/FITC  熒光素標記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgG
    Anti-BSP/FITC  熒光素標記骨涎蛋白抗體IgG
    Anti-C/FITC  熒光素標記過敏毒素C(補體C)抗體IgG
    Anti-CA125/FITC  熒光素標記卵巢癌抗原抗體IgG

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