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    猴B病毒ELISA試劑盒*

    時間:2013/5/15閱讀:388
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                                                       猴B病毒ELISA試劑盒*

     
    本試劑盒僅供研究使用。                                                      96T
    名稱:
    通用名:猴B病毒酶聯免疫分析試劑盒
    使用目的:
    本試劑盒定性測定猴血液、或其它相關組織中B病毒的表達
    實驗原理:
    本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)測定標本中猴B病毒。用純化的B病毒抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中B病毒相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的B病毒抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中猴B病毒的存在與否。
    猴B病毒ELISA試劑盒*試劑盒組成:

    1
    30倍濃縮洗滌液
    20ml×1瓶
    7
    終止液
    6ml×1瓶
    2
    酶標試劑
    6ml×1/瓶
    8
    陽性對照
    0.5ml×1瓶
    3
    酶標包被板
    12孔×8條
    9
    陰性對照
    0.5ml×1瓶
    4
    樣品稀釋液
    6ml×1瓶
    10
    說明書
    1份
    5
    顯色劑A液
    6ml×1瓶
    11
    封板膜
    2張 
    6
    顯色劑B液
    6ml×1瓶
    12
    密封袋
    1個

    標本要求:
    1.標本處理:血清、血漿標本可直接檢測
    2.標本按要求制備后盡早進行實驗。如不能及時檢測,可將標本在-20℃保存一個月,但應避免反復凍融。
    3.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    猴B病毒ELISA試劑盒*操作步驟:
    1.         編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
    2.         加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照(標準品)50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
    3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
    4.         配液:將30倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
    5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    7.         溫育:操作同3。
    8.         洗滌:操作同5。
    9.         顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
    10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
     結果判定:
      試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.15
     臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
     陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為猴B病毒陰性
     陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為猴B病毒陽性
    注意事項
    1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
    2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    5.底物請避光保存。
    6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm
    7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。
     猴B病毒ELISA試劑盒*保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:;2-8℃。
    2.有效期:6個月

     

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