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  • 上海博研生物科技有限公司
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    人CF211 ELISA試劑盒免費代測

    時間:2014/10/14閱讀:290
    分享:

    CF211 ELISA試劑盒免費代測

    本試劑盒僅供研究使用。

    檢測范圍:                                                          96T

    20pg/ml-480pg/ml

    使用目的:

    本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中CF211含量

    實驗原理

    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中CF211水平。用純化的CF211抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入CF211再與HRP標(biāo)記的CF211抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CF211呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中CF211濃度。

    人CF211 ELISA試劑盒免費代測試劑盒組成

    1

    30倍濃縮洗滌液

    20ml×1

    7

    終止液

    6ml×1

    2

    酶標(biāo)試劑

    6ml×1

    8

    標(biāo)準(zhǔn)品(960pg/ml

    0.5ml×1

    3

    酶標(biāo)包被板

    12孔×8

    9

    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    1.5ml×1

    4

    樣品稀釋液

    6ml×1

    10

    說明書

    1

    5

    顯色劑A

    6ml×1

    11

    封板膜

    2 

    6

    顯色劑B

    6ml×1/

    12

    密封袋

    1

    標(biāo)本要求

    1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步驟

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    480pg/ml

    5號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    240pg/ml

    4號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    120pg/ml

    3號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    60pg/ml

    2號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    30pg/ml

    1號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    1. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    2. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  
    3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
    4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
    5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
    6. 溫育:操作同3
    7. 洗滌:操作同5
    8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
    9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
    10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    人CF211 ELISA試劑盒免費代測操作程序總結(jié):

    計算

      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

    注意事項

    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

    2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

    3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

    1. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    2. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物請避光保存。

    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

    9.本試劑不同批號組分不得混用。

    10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

    人CF211 ELISA試劑盒免費代測保存條件及有效期

    1.試劑盒保存:2-8

    2.有效期:6個月

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