單克隆抗體技術(shù)檢測(cè)新城疫

單克隆抗體僅僅識(shí)別一個(gè)抗原位點(diǎn)，用抗病毒蛋白的單克隆抗體就可以檢測(cè)出各種病毒毒株表面抗原之間的微小差異，從而通過抗原差異來研究病毒的變異并可對(duì)其分群歸類。20世紀(jì)80年代以來，國(guó)內(nèi)外很多實(shí)驗(yàn)室已制備出多株NDV單克隆抗體，并用其測(cè)知NDV有很多變種。

Russell等在1983年早以Ulster 2C弱毒株為抗原研制出針對(duì)新城疫病毒不同多肽成分的9株單克隆抗體，將新城疫病毒的毒株分為A—H 8個(gè)群，同一群中的病毒與這些單抗的反應(yīng)譜相同，大多數(shù)具有共同的生物學(xué)和流行病學(xué)特征。隨后國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者分別研究出了針對(duì)新城疫病毒不同特征的單抗，應(yīng)用于病毒抗原差異等的研究。因?yàn)閭鹘y(tǒng)的新城疫診斷中，使用多克隆抗血清進(jìn)行HI試驗(yàn)來鑒定病毒，這種試驗(yàn)除可證明病毒存在外，不能提供病毒的任何其他信息，而為了分型常需進(jìn)行其他的試驗(yàn)。這種診斷所存在的問題，會(huì)隨著新城疫變異株的增多而增多，而且，HI試驗(yàn)中與其他一些禽副黏病毒（尤其是與PMV-3型）存在交叉反應(yīng)。單抗的應(yīng)用克服了常規(guī)血清的交叉反應(yīng)問題，所以應(yīng)用單抗診斷新城疫病毒的研究日益增多。

Meulemans等用兩種單抗混合物進(jìn)行HI試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)它能夠高度抑制所有新城疫病毒被檢株，但與其他血清型的禽副黏病毒代表株不發(fā)生交叉反應(yīng)。

Alexander等應(yīng)用一種單抗，能在常規(guī)HI試驗(yàn)中抑制大多數(shù)新城疫病毒毒株，但不能抑制近來流行于鴿的變異株。

Judit等（1989）選出一株單抗在ELISA試驗(yàn)中對(duì)所有被檢的300多個(gè)強(qiáng)毒、中等毒力和弱毒株只能與LaSota株結(jié)合。

曹殿軍等制備了46株抗新城疫病毒單抗，檢測(cè)它們與不同新城疫病毒毒株的反應(yīng)性，證明單抗能檢出強(qiáng)、弱毒株之間的差異，為建立一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、省時(shí)省力的新城疫病毒強(qiáng)、弱毒株鑒別診斷方法提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但由于單抗的制備比較復(fù)雜、困難，限制了該技術(shù)的廣泛應(yīng)用。

對(duì)單克隆抗體分組的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，在同組里的毒株有明顯的生物學(xué)及流行病學(xué)上的，這對(duì)抗原的變異及病毒的流行擴(kuò)散的研究都有重要意義。
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