免疫組化一抗選擇要點(diǎn)和技巧

 免疫組化一抗選擇要點(diǎn)和技巧

要點(diǎn)：一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的東西的基團(tuán)，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)（底物和二抗）。  

一抗盡量選擇單克隆抗體，還要注意其抗體來源（兔抗、鼠抗或者其他）要與二抗匹配。至于進(jìn)口還是國產(chǎn)我覺得要看是什么組織，當(dāng)然大多數(shù)情況下還是進(jìn)口的好一點(diǎn)，也可以咨詢本公司業(yè)務(wù)員：電　　話：/60520498

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抗體選擇首先考慮你需要染得的組織或細(xì)胞的來源，其次考慮在染色中需要不需要抗體雙標(biāo)，明確了這一點(diǎn)后，就可以考慮你所需要的抗體的來源。在購買抗體的時(shí)候，如果你需要標(biāo)記的蛋白是比較穩(wěn)定、表達(dá)量比較高或者說是已經(jīng)非常常用的蛋白，那么可以考慮國產(chǎn)的抗體，如中杉或者博士德。如果是比較新的蛋白，或者是不太清楚的蛋白表達(dá)量的，建議你用進(jìn)口的抗體，如abcam、cell signal、sata等，進(jìn)口的抗體中sata的抗體比較便宜，但是用過后老是覺得抗體效價(jià)一般。

相關(guān)抗體反應(yīng)規(guī)律：

（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時(shí)，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短。 　　

（2）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時(shí)，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低。隨后，抗體效價(jià)迅速大量增加，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長。 　　

（3）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過一定時(shí)間后可逐漸消失。此時(shí)若再次接觸抗原，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同，則稱為特異性回憶反應(yīng)；若與初次反應(yīng)不同，則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時(shí)性的，短時(shí)間內(nèi)即很快下降。

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟：

1、制備抗原。 　

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。 　

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。 　

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。