農藥殘留檢測試劑使用說明書

【簡   介】

農藥殘留（Pesticide residues)，是農藥使用后一個時期內沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農藥原體、有毒 代謝物、 降解物和雜質的總稱。施用于作物上的農藥，其中一部分附著于作物上，一部分散落在土壤、大氣和水等環境中，環境殘存的農藥中的一部分又會被植物吸收。殘留農藥直接通過植物果實或水、大氣到達人、畜體內，或通過環境、食物鏈最終傳遞給人、畜。造成蔬菜農藥殘留量超標的主要是一些國家禁止在蔬菜生產中使用的有機磷農藥和氨基甲酸酯類農藥，食用含有大量高毒、劇毒農藥殘留引起的食物會導致人、畜急性中毒事故。長期食用農藥殘留超標的農副產品，雖然不會導致急性中毒，但可能引起人和動物的慢性中毒，導致疾病的發生，誘發癌癥，甚至影響到下一代。

【檢測原理】

根據國標GB/T5009.199-2003，有機磷或氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶有抑制作用，從而影響乙酰膽堿酯酶、硫代乙酰膽堿（作為底物）、二硫代二硝基苯甲酸（作為顯色液）間的顯色反應，根據反應后溶液顏色的深淺即可計算出樣品中的農藥殘留量；如果乙酰膽堿酯酶被抑制程度越嚴重，則反應而生成的黃色化合物也越少，說明檢測樣品中農藥殘留越多，反之越少；而生成的黃色物質在412 nm處有*的吸收峰，由此可對樣品中有機磷或氨基甲酸酯類農藥進行定量測定。

檢測結果以乙酰膽堿酯酶被抑制程度（抑制率）表示，計算公式為：抑制率(%)=(ΔA_c-ΔA_s)/ ΔA_c×100%；式中，ΔA_c為對照組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差；ΔA _s為樣品組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差。

【檢測對象】

蔬菜、水果、茶葉、糧食、肉、蛋、奶、水產品等。

【技術指標】

檢測下限：1% (抑制率)

檢測范圍：0-100% (抑制率)

【生產日期】

生產日期：見外包裝。

【保 質 期】

保質期：12個月（4℃冷藏）。

【試劑配制】

① 緩沖液：將緩沖液試劑袋中的試劑倒出，溶于500ml 蒸餾水中，溶解、混勻即可。

② 底物：往標注為底物的瓶中加入10.3ml蒸餾水。2~4ºC環境下冷藏保存。

③ 顯色劑：往標注為顯示劑的瓶中加入26ml的緩沖液，輕搖使*溶解。

④ 酶試劑：酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在2~4ºC環境條件下冷藏保存。

以上試劑不使用時，需放在2~4ºC環境條件下冷藏保存；使用時，從冰箱取出，放置室溫后進行檢測。

【操作方法】

1）空白對照測試：

取一比色瓶，用相應的移液器吸取對應的試劑，并按以下順序依次向比色瓶加入：

將比色瓶搖晃5次左右，倒入比色皿。將比色皿放入通道中，點擊“對照”鍵，平板顯示對照數值。

2）樣品測試：

稱取2.0g樣品(大小1cm見方即可)放入樣品杯中，加入10mL緩沖液后，振蕩提取2分鐘；過濾，濾液即為樣品提取液。

取另一比色瓶，用相應的移液器吸取對應的試劑，并按以下順序依次向比色瓶加入：

將比色瓶搖晃5次左右，倒入比色皿。將比色皿放入通道中，點擊“樣品”鍵，平板顯示樣品結果。

【執行標準】

① 根據國標GB/T5009.199-2003，樣品的抑制率小于等于40%為合格樣品，樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農殘超標樣品；

② 抑制率＞50%為農殘超標樣品，表明被測樣品的農藥殘留毒性可能超過安全的界定標準，建議用氣相色譜等儀器分析法作進一步確認。

【注意事項】

① 加入底物后，應迅速混勻，立即測試。

② 若浸提液清澈無色或顏色較淺，取上清液待測；

若浸提液混濁，離心，取上清液待測；

若浸提液色素干擾嚴重，可用活性炭脫色，具體方法如下：

將浸提液轉移至另一個三角瓶中，加入0.1~0.5g活性碳(根據顏色深淺調整)，水浴70℃加熱5分鐘，取出趁熱過濾，濾液待測。

③ 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）浸提，避免次生物物質干擾。

④ 所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害，使用時請做好防護。不慎沾到皮膚應立即擦干并用大量水沖洗。

⑤ 檢測試劑請務必在2~4ºC冰箱保存。