輔酶ⅡNADP(H)含量微量法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit，48T/96T
人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA Kit，48T/96T
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小鼠胚胎干系MESPU30(M30)ELISA Kit，48T/96T
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6349 |
商品介紹
測定意義 輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NADP+和NADPH含量測定可以計(jì)算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。 測定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍(lán)（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測吸光值，從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測NADP+含量。 所需的儀器和用品 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；
（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測，通常可以使測定正常。
Rhizobium sp.低氧誘導(dǎo)因子-1檢測試劑盒
Azospirillum sp.低氧誘導(dǎo)因子-1α檢測試劑盒
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Corynebacterium ammoniagenes凋亡相關(guān)因子檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes丁酰酯檢測試劑盒
輔酶ⅡNADP(H)含量微量法檢測試劑盒正辛 AR,99%化肌球蛋白抗體CLNS1A/pICln 離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A抗體
1,2- AR,99%化肝生長因子受體(原癌因)抗體CLN6 神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體
紅鋁溶液 70 wt%溶液絲裂原活化蛋白激MKK6抗體CLN3 神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體
氫化鈉 98%化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體CLLD8/SETDB2 組蛋白H3-K9轉(zhuǎn)移抗體
三乙烯四 Standard for GC化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體CLLD7 核苷交換因子CLLD7抗體
三乙烯四 CP,68%嗜粒趨化蛋白22抗體CLLD6/C13orf1 慢性淋巴白血病缺失因6蛋白抗體
三乙烯四 AR,70%硫氨腦啡肽抗體CLK3 分裂周期樣激3抗體
三乙烯四 色譜固定液抗體CLK2 分裂周期樣激2抗體
三異 95%質(zhì)金屬蛋白9抗體CLIP1/CLIP170 質(zhì)連接蛋白1抗體
3,5,5-己 97%原癌因M-ras抗體CLIC4 內(nèi)離子通道蛋白4抗體
三羥烷 98%單核趨化蛋白1抗體Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) 鹽克侖特羅/抗體
3,4,5,6-四氫酐 98%抗體CLECSF9/CLEC 4E C型凝集素4家族E抗體
己二 98%雞支原體抗體CLEC5A/MDL1 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體
三硅烷 98%線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體CLEC2D/OCIL CLEC2D蛋白抗體
六亞二異酯 97%有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體
測定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測定（在96孔板中依次加入下列試劑）
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
