普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,伊紅法)100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,伊紅法)100ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H034人腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HCT-8細(xì)胞，人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HME4細(xì)胞 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-H097人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IL10RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL10RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC
RWPE2細(xì)胞，人前列腺上皮細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系,N/N1003A(RLE)細(xì)胞 小鼠心肌細(xì)胞MCM
LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
ACHN(人腎癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R043大鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1
ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF tRNA
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17
QGY-7703細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 表皮癌細(xì)胞系,A431細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));DG6-VAP33-GFP
CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒 ，英文名： CTGF ELISA Kit
人血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T
水泡病毒(SVDV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
CLIAKitforNE(Rabbitneutrophilelastase)ELISAKit兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶規(guī)格：48T/96T
體液HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitNAG人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶規(guī)格：48T/96T
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endothelial lipase (EL) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒
Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAquaporin0,AQP-0ELISA試劑盒人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humantissueinhibitorofmetalprotease1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,伊紅法)100ml實(shí)驗(yàn)方法兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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