實(shí)驗(yàn)操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞：H4 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | GOY-01X0087 |
產(chǎn)品介紹：
名稱 腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞：H4
別稱H-4
年齡（性別）37歲
組織來源腦組織
生長特性貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述H4細(xì)胞建系于1973年；它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。H4細(xì)胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽，細(xì)胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。H4細(xì)胞具有修復(fù)MNNG損傷5型腺病毒的能力。
生物安全等級1
生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium.
處理方法：
收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。
5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。
注意事項(xiàng)：
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
大鼠 PDCD1LG2 基因全長ORF克隆
大鼠 IL22RA1 基因全長ORF克隆
大鼠 SELP 基因全長ORF克隆
大鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF14 基因全長ORF克隆
大鼠 PDCD1 基因全長ORF克隆
大鼠 BMP8A 基因全長ORF克隆
大鼠 CRISP2 基因全長ORF克隆
大鼠 CTSS 基因全長ORF克隆
大鼠 SERPINE1 基因全長ORF克隆
腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞：H4 革蘭氏陰性菌（G-）選擇性培養(yǎng)基 Gram Negative Bacteria Selective Medium 250g
5g 蘇丹黑 B Sudan Black B 室溫保存
250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH9.5 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.5 常溫保存
2 ug pTCK303 pTCK303 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
IMP3/IGF-IIBP3 胰島素樣生因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗牛IgG腹水 規(guī)格: 1ml
Prohibitin 抑制素/瘤抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
DISC1(NT) DISC1 N端抗體 規(guī)格: 0.2mlADAMTSL2 整合素樣金屬蛋白與凝樣2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.6 HEPES Buffer,0.5M,pH7.6 常溫保存
phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
