胚腎細胞：293T/17

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    胚腎細胞：293T/17 

別稱HEK 293T/17; 293T/17

種屬人類

年齡（性別）胎兒

組織來源腎

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述293T/17細胞株是293T細胞株的衍生株，293T是293 [HEK-293]細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細胞進行克隆，檢測pBND和pZAP載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T/17細胞。293T/17細胞持續(xù)表達猿病毒40(SV40)大T抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。293T/17細胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到ANJOU65細胞株，ANJOU65細胞再用pCRIPgag-2和pGPT2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達細胞株BOSC 23。ANJOU65細胞用攜帶gpt抗性基因的pCRIPAMgag載體轉(zhuǎn)染得到Bing雙向性表達包裝細胞株。

生物安全等級2

生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

注意事項該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正常現(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 VASN / Vasorin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 LMAN2L 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 MFAP5 / MAGP2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 B3GNT2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 SCAows\system32\EhStorShell.dll

胚腎細胞：293T/17 ADCY1  苷酸環(huán)化1抗體 0.2ml

5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存

Signal recognition particle  信號識別顆粒抗體 規(guī)格: 0.1mlGDPD3  甘油磷酸二酯磷酸結(jié)構(gòu)域3抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCDH7  原鈣粘蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml

Orosomucoid 2  類粘蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

SP-A  肺表面活性蛋白A抗體 規(guī)格: 0.1ml

CHCHD6  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體 規(guī)格: 0.2ml

10g 1,4- 二乙磺酸 1,4-Piperazinediethane Sulfonic Acid  (PIPES) 室溫干燥保存

1瓶 HUVEC(sciencell)細胞株 HUVEC(sciencell) 低溫運輸和保存

礦物鹽瓊脂 Mineral Salts Agar 250g

100U Vent DNA 聚合 Vent (exo-)DNA Polymerase -20℃保存

2 ug pX462 pX462 低溫運輸，-20℃保存